Современные методы диагностики вич-инфекции. Все виды анализов на вич Тест система 4 поколения вич
В последние годы наблюдается весомый прогресс в области выявления этой страшной болезни: на смену старым тест-системам приходят более совершенные, методы обследования становятся более доступными, и их точность значительно повышается.
В данной статье расскажем о современных методах диагностики ВИЧ-инфекции, знать которые полезно для своевременного лечения данной проблемы и поддержания нормального качества жизни заболевшего.
Методики диагностики ВИЧ
В России для диагностики ВИЧ-инфекции проводится стандартная процедура, включающая в себя два уровня:
Также для диагностики могут применяться другие методики:
ИФА тест-системы
На первом этапе диагностики для выявления ВИЧ-инфекции применяется скрининговый тест (ИФА), который основан на созданных в лабораториях белках ВИЧ, улавливающих вырабатывающиеся в организме в ответ на инфицирование специфические антитела. После их взаимодействия с реагентами (ферментами) тест-системы изменяется окраска индикатора. Далее эти изменения цвета обрабатываются на специальной аппаратуре, которая и определяет результат выполненного анализа.
Такие ИФА-тесты способны показывать результат уже через несколько недель после внедрения ВИЧ-инфекции. Этот анализ определяет не наличие вируса, а выявляет выработку антител к нему. Иногда, в организме человека выработка антител к ВИЧ начинается через 2 недели поле заражения, но у большинства людей они вырабатываются на более поздних сроках, спустя 3-6 недель.
Существует четыре поколения ИФА-тестов с различной чувствительностью. В последние годы чаще применяются тест-системы III и IV поколения, которые созданы на основе синтетических пептидов или рекомбинантных белков и обладают большей специфичностью и точностью. Они могут использоваться для диагностики ВИЧ-инфекции, мониторинга распространенности ВИЧ и обеспечения безопасности при проверке донорской крови. Точность ИФА-тест-систем III и IV поколения составляет 93-99% (более чувствительны тесты, которые выпускаются в странах западной Европы – 99%).
Для выполнения ИФА-теста проводится забор 5 мл крови из вены пациента. Между последним приемом пищи и анализом должно пройти не менее 8 часов (как правило, он выполняется утром натощак). Такой тест рекомендуется сдавать не ранее, чем через 3 недели после предполагаемого заражения (например, после незащищенного полового акта с новым половым партнером).
Результаты ИФА-теста получаются через 2-10 дней:
- отрицательный результат: указывает на отсутствие инфицирования ВИЧ и не требует обращения к специалисту;
- ложноотрицательный результат: может наблюдаться на ранних сроках инфицирования (до 3 недель), при поздних стадиях СПИДа при выраженном подавлении иммунитета и при неправильно проведенной подготовке крови;
- ложноположительный результат: может наблюдаться при некоторых заболеваниях и при неправильно проведенной подготовке крови;
- положительный результат: указывает на заражение ВИЧ инфекцией, требует проведения ИБ и обращения пациента к специалисту в центр СПИДа.
Почему ИФА-тест может давать ложноположительные результаты?
Ложноположительные результаты ИФА-теста на ВИЧ могут наблюдаться при неправильной обработке крови или у больных с такими состояниями и заболеваниями:
- множественная миелома;
- алкогольный гепатит;
- инфекционные заболевания, спровоцированные вирусом Эпштейна-Барр;
- состояние после диализа;
- аутоиммунные заболевания;
- на фоне беременности;
- состояние после вакцинации.
При вышеописанных причинах в крови могут присутствовать неспецифические перекрестно реагирующие антитела, выработка которых была спровоцирована не ВИЧ-инфекцией.
В последние годы частота ложноположительных результатов существенно снизилась благодаря применению тест-систем III и IV поколения, которые содержат более чувствительные пептидные и рекомбинантные белки (они синтезируются при помощи генной инженерии in vitro). После начала применения таких ИФА-тестов частота ложноположительных результатов значительно снизилась и составляет около 0,02-0,5%.
Выявление ложноположительного результата не означает, что человек инфицирован ВИЧ. В таких случаях ВОЗ рекомендует провести еще один ИФА-тест (обязательно IV поколения).
Кровь пациента отправляется в референс или арбитражную лабораторию с пометкой «повторить» и исследуется на ИФА тест-системе IV поколения. Если результат нового анализа отрицательный, то первый результат признается ошибочным (ложноположительным) и ИБ не проводится. При положительном или сомнительном результате во время второго теста больному обязательно назначается проведение ИБ через 4-6 недель для подтверждения или опровержения ВИЧ-инфицирования.
Иммунный блоттинг
Окончательный диагноз инфицирования ВИЧ может устанавливаться только после получения положительного результата иммунного блоттинга (ИБ). Для его проведения применяется нитроцеллюлозная полоска, на которую нанесены вирусные белки.
Забор крови для ИБ выполняется из вены. Далее она подвергается специальной обработке и содержащиеся в ее сыворотке белки разделяют в специальном геле по их заряду и молекулярной массе (манипуляция проводится на специальной аппаратуре под воздействием электрического поля). На гель из сыворотки крови накладывают нитроцеллюлозную полоску и проводят блоттинг («промакивание») в специальной камере. Полоска обрабатывается и если в используемых материалах есть антитела к ВИЧ, то они связываются с антигенными полосами на ИБ и проявляются в виде линий.
ИБ считается положительным если:
- по критериям American CDC – на полоске есть две или три линии gp41, p24, gp120/gp160;
- по критериям American FDA – на полоске есть две линии р24, р31 и линия gр41 или gр120/gр160.
В 99,9% случаев положительный результат ИБ указывает на ВИЧ-инфицирование.
При отсутствии линий – ИБ является отрицательным.
При выявлении линий с gр160, gр120 и gр41- ИБ является сомнительным. Такой результат может выявляться при:
В таких случаях рекомендуется выполнение повторного исследования при помощи набора другой фирмы. Если же после дополнительного ИБ результат остается сомнительным, то необходимо наблюдение в течение полугода (через каждые 3 месяца проводятся ИБ).
Полимеразная цепная реакция
Тест на ПЦР может определять РНК вируса. Его чувствительность достаточно высока и он позволяет выявлять ВИЧ-инфицирование уже через 10 дней после заражения. В некоторых случаях ПЦР может давать ложноположительные результаты, т. к. его высокая чувствительность может реагировать и на антитела к другим инфекциям.
Данная методика диагностики является дорогостоящей, требует специального оборудования и высокой квалификации специалистов. Эти причины не дают возможности проводить ее при массовом тестировании населения.
ПЦР применяется в таких случаях:
- для выявления ВИЧ у новорожденных, которые родились от ВИЧ-инфицированных матерей;
- для выявления ВИЧ в «периоде окна» или при сомнительном ИБ;
- для контроля концентрации ВИЧ в крови;
- для исследования донорской крови.
Только по тесту ПЦР диагноз ВИЧ не ставится, а проводится в качестве дополнительного метода диагностики для разрешения спорных ситуаций.
Экспресс-методы
Одной из инноваций в диагностике ВИЧ стали экспресс-тесты, результаты которых могут оцениваться уже черезминут. Наиболее эффективные и точные результаты получаются при помощи иммунохроматографических тестах, основанных на принципе капиллярного потока. Они представляют собой специальные полоски, на которые наносится кровь или другие исследуемые жидкости (слюна, моча). При наличии антител к ВИЧ спустяминут на тесте появляются цветная и контрольная полоска – положительный результат. При отрицательном результате – появляется только контрольная полоска.
Как и после тестов ИФА, результаты экспресс-тестов должны подтверждаться анализом ИБ. Только после этого может ставиться диагноз о ВИЧ-инфицировании.
Существуют экспресс-наборы для домашнего тестирования. Тест OraSure Technologies1 (США) одобрен FDA, продается без рецепта и может применяться для выявления ВИЧ. После проведения теста, в случае положительного результата, больному рекомендуется пройти обследование в специализированном центре для подтверждения диагноза.
Остальные тесты для домашнего использования еще не были одобрены FDA и их результат может быть очень сомнительным.
Несмотря на то, что экспресс-тесты по своей точности уступают ИФА-тестам IV поколения, они широко применяются для дополнительного тестирования населения.
Сдать анализы на выявление ВИЧ-инфекции можно в любой поликлинике, ЦРБ или в специализированных СПИД-центрах. На территории России они проводятся абсолютно конфиденциально, или анонимно. Каждый пациент может рассчитывать на получение медицинской или психологической консультации до или после проведения анализа. Платить за тесты на ВИЧ придется только в коммерческих лечебных учреждениях, а в государственных поликлиниках и больницах они выполняются бесплатно.
О том, какими путями можно заразиться ВИЧ-инфекцией и какие мифы существуют о возможностях заразиться, читайте в этой статье.
К какому врачу обратиться
Чтобы обследоваться на ВИЧ-инфекцию, нужно посетить терапевта и взять у него направление на анализ. Кроме того, можно прийти непосредственно в Центр профилактики и борьбы со СПИДом и сдать анализы там анонимно. Направляет на это обследование и врач-инфекционист или венеролог при подозрении на ВИЧ-инфекцию.
В каких случаях и в какие сроки проводится ИФА на ВИЧ?
Вирус иммунодефицита человека – опасное заболевание, которое, несмотря на усилия специалистов в области медицины, имеет высокие темпы к распространению. Борьбе с этим заболеванием во всем мире уделяется немало внимания. Но чудодейственная вакцина от СПИДа до сих пор не найдена. В современной медицине существует несколько способов диагностики вируса иммунодефицита, но самым распространенным среди них является иммуноферментный анализ. ИФА на ВИЧ стал применяться несколько десятилетий назад. Все эти годы данный метод диагностики совершенствовался. И на сегодня его считают также и одним из самых точных. Достоверность ИФА теста на ВИЧ велика. Она составляет девяносто шесть – девяносто восемь процентов. Погрешность на ложноположительный или ложноотрицательный результат небольшая. Благодаря этому популярность подобной диагностики становится понятной. Как выявляется ВИЧ методом ИФА, где можно сдать данный анализ и как к нему подготовиться?
Описание теста ИФА на ВИЧ
ИФА-анализ на ВИЧ направлен на выявление в крови человека антител к данному заболеванию. Попадая в организм человека данный вирус начинает в нем активную деятельность не сразу. Соответственно, до определенного момента выявить его бывает невозможно. Специалисты в области медицины рекомендуют проверяться на вирус иммунодефицита не ранее, чем через несколько недель после предполагаемого инфицирования.
ИФА антитела к ВИЧ определяет с высокой долей вероятности. Стоит отметить, что данный анализ способен выявить антитела в сыворотке крови. Он определяет не только их присутствие. ИФА крови ВИЧ помогает выявить также и суммарный спектр антител. В некоторой степени такая информация помогает определить время, в которое инфицирование произошло с точностью до недели. Нужно это не только для того, чтобы инфицированный человек мог предположить, при каких обстоятельствах произошло заражение. Количество антител к ВИЧ при ИФА – это информация, которая также нужна и специалистам в области медицины. С ее помощью в дальнейшем они могут контролировать состояние больного, определяя с большой точностью, как будет вести себя вирус в ближайшие недели или месяцы. Сдать кровь методом ИФА на ВИЧ могут предложить больному с уже поставленным диагнозом. Эта процедура необходима для того, чтобы определить количественный состав антител и назначить правильную схему антиретровирусной терапии.
В современной медицине, в частности и в нашей стране сегодня используется ИФА 4 поколения на ВИЧ. Этот анализ совершенствовался годами, и сегодня достоверность его составляет девяносто шесть – девяносто восемь процентов. Погрешность невелика, но она есть. Поэтому, для подстраховки, больных с установленным посредством иммуноферментного анализа диагнозом проверяют еще и при помощи иммунного блоттинга. Иными словами, ИФА тест системы 4 поколения на ВИЧ позволяют с большей долей вероятности определить людей без диагноза вирус иммунодефицита. Повторная проверка в этом случае не проводится. Если же иммуноферментный анализ показывает наличие антител к вирусу иммунодефицита, пациентов направляют на другие виды анализов.
Как выполняется анализ на ВИЧ методом ИФА?
Анализ крови ИФА на СПИД берется из вены. Как и при других известных способах исследования на предмет выявления вируса иммунодефицита, в качестве биологического материала при иммуноферментном тестировании используют сыворотку крови. Пациент приходит на анализ натощак. Особых ограничений в плане приема пищи и воздержания от алкоголя в этом плане нет. Однако избыточное употребление спиртосодержащих напитков перед исследованием может отрицательно повлиять на результат. Об этом следует знать всем.
Антитела к ВИЧ методом ИФА выявляются в несколько стадий. Помимо биологического материала пациента, в данном случае это венозная кровь, для подобной процедуры необходима искусственная сыворотка с белком вируса иммунодефицита и твердая основа. В качестве последней используется специальный планшет, который может быть изготовлен из полистирола или других умеренно-пористых материалов. Исследование образцов крови в ИФА на ВИЧ СПИД начинается с соединения крови пациента с белком, в котором содержится вирус. После этого лаборант наблюдает реакцию, в которую вступает сыворотка крови пациента с клетками заболевания. Осуществляется несколько промывок испытуемого материала специальными ферментами. Если реакция оказывается стойкой и начинается выработка антител, значит, в организме пациента присутствует вирус иммунодефицита. Однако окончательных выводов на основании иммуноферментного анализа на ВИЧ медики не делают. Для этого используются дополнительные методы диагностики.
Стоит отметить, что ИФА ВИЧ 3 поколения применяется до сих пор. От тест-систем четвертого поколения его незначительно отличают более эффективные ферменты. Но этот анализ является менее дорогостоящим, поэтому чаще всего его используют в государственных поликлиниках.
Анализ ИФА на ВИЧ: сроки проверки
Специализированные лаборатории диагностики ВИЧ ИФА сегодня есть во всех больших городах. В крупных лабораториях, специализирующихся на проведении различных анализов, также осуществляется проверка методом иммуноферментного тестирования. Стоит отметить, что возможность сдать ИФА на ВИЧ, через месяц (достоверность результата во многом зависит от срока проверки) или большее время с предполагаемого заражения, сегодня есть у людей, проживающих в небольших населенных пунктах. И для этого им совсем не обязательно приезжать в областные центры. Прием анализов на вирус иммунодефицита осуществляется во всех поликлиниках и даже в некоторых сельских и поселковых амбулаториях. Правда, сотрудники небольших медицинских учреждений в дальнейшем направляют образцы сыворотки крови в специализированные лаборатории. Исследование на ВИЧ методом ИФА в обоих случаях не будет разниться по результатам. Единственный минус «отправных» анализов заключается в том, что сроки их готовности дольше. Иными словами, жители мегаполисов узнают результаты проверки на следующий день или даже в этот же день. Те, кто сдает анализ в небольших городах, иногда ждут результатов ИФА от одной до нескольких недель.
ИФА на ВИЧ через месяц, два или несколько недель: когда сдавать анализ?
Основной ошибкой людей, желающих провериться на наличие в их крови вируса иммунодефицита, является то, что они слишком рано после предполагаемого инфицирования сдают анализы. Специалисты в области медицины рекомендуют осуществлять такого рода проверку минимум через три недели. ИФА на ВИЧ через 4-6 недель покажет результат всегда или нет? Этот вопрос нередко задают специалистам в области медицины. Ответить на него утвердительно и заявить о том, что ИФА на ВИЧ через 5 недель, 6 или месяц покажет стопроцентно, никто не в праве. Здесь все зависит от индивидуальных особенностей организма. Дело в том, что попадая в кровь или другую среду, клетки вируса не сразу переходят к активным действиям. На то, чтобы начать размножение внутри человеческого организма, а также на то, чтобы перейти к уничтожению лейкоцитов, им требуется определенное время. ИФА при ВИЧ-инфекции в период, когда клетки вируса не распространились в крови в достаточном количестве, является неэффективным. Именно поэтому, проводить такой анализ через день или даже неделю после предполагаемого заражения бессмысленно. Такой период специалисты в области медицины называют серонегативным окном. Стоит отметить одну его характерную особенность. Установить наличие вируса иммунодефицита в организме в этот период невозможно. Но человек, у которого заболевание все еще не обнаруживается, уже является потенциально опасным для других, поскольку может распространять вирус.
ИФА анализ крови на ВИЧ через 3-4 месяца выявит наличие данного заболевания. В некоторых случаях именно в этот период человек впервые узнает о страшном диагнозе. Это зависит от некоторых особенностей организма. На то, определит Ифа ВИЧ через 2 месяца, месяц или несколько недель во многом влияет и то, в какой концентрации вирус попал в организм. Если речь идет о переливании крови или незащищенном контакте, то концентрация его явно будет велика. Стало быть, по ИФА ат аг на ВИЧ определить можно будет не через 5 месяцев, а значительно раньше. В редких случаях узнать о наличии страшного диагноза люди могут значительно позже. Зафиксированы случаи, когда ИФА на ВИЧ показывал положительный результат только через год. Определить это удавалось по концентрации клеток вируса. К счастью, такие случаи – большая редкость. Они составляют всего 0,5% среди всех инфицированных.
Где сдать ИФА на ВИЧ 1, 2?
Вопрос о том, где сдать ИФА на ВИЧ через 3 или 8-10 недель после предполагаемого заражения, интересует многих. В нашей стране сделать это можно в поликлинике по месту жительства или временного проживания. Процедура является бесплатной. Для того чтобы сдать ИФА на ВИЧ через 12 недель или раньше, не нужно брать направление у терапевта или вирусолога. О своем желании пройти проверку на предмет наличия данного заболевания следует сообщить сотруднику регистратуры. При себе следует иметь паспорт и полис обязательного медицинского страхования. Кстати, с недавних пор, пройти проверку можно анонимно. Такое тестирование на вирус иммунодефицита также является бесплатным. Пациенту присваивается индивидуальный номер, по которому он сможет узнать результаты после того, как они будут готовы.
Что такое ИФА на ВИЧ и его особенности
Сдавая анализы всегда хочется получить только достоверные ответы. Особенно, когда проводится исследование на иммунодефицит. Именно в таком случае важна точность тестов на ВИЧ, ведь от этого зависит дальнейшее здоровье человека и его родных. Тестирование на ВИЧ делают практически в каждой клинической лаборатории. Для этого достаточно сдать небольшое количество крови и подождать несколько дней до выдачи результата. ИФА анализ на ВИЧ самый распространенный метод анализа помогающий выявить антитела на вирус, что подтверждает его наличие в организме зараженного.
Что такое ИФА
Этот метод исследования делает иммуноферментный анализ, который строится на обнаружении антител. Этот метод обладает иммунохимической реакцией, что позволяет увидеть с каким антигеном связано антитело. Этот анализ считается одним из наиболее точных и удобных. Его используют даже в случае, когда методом ПЦР после вирусной нагрузки не удалось получить точный ответ.
Самый распространенный гетерогенный вариант ИФА. В нем кровь пациента смешивают с антигеном и добавляют антитела, помогая создать молекулярную цепочку. Именно в ней и можно обнаружить белок вируса и доказать, что ВИЧ в организме человека есть.
Когда проводят ИФА
Так как вирус не виден сразу после возможного заражения, необходимо некоторое время для его размножения и выявления. Только исследования помогают дать более достоверный ответ. В зависимости от концентрации вируса в организме и способа его попадания, он может проявиться спустя пару недель или несколько месяцев. Определить когда он точно проявится никто не знает, у каждого инфицированного индивидуальный срок.
Поэтому советуют делать анализ ИФА несколько раз. В основном его рекомендуется проводить через 6 недель, через 3 месяца и через полгода. Именно такой период, от попадания вируса в организм и до его выявления, будет серонегативным окном. Поэтому в период окна проводят ИФА анализ на ВИЧ. Зарубежные врачи рекомендуют делать анализ на ВИЧ через 3 месяца, игнорируя полугодовой анализ. Но многое зависит от самого ИФА и его поколения. Тем более люди постоянно волнуются и боятся, что ВИЧ не проявит себя за это время. Чтобы действительно быть уверенным и успокоить себя, проходят этот анализ трижды.
Особенности ИФА
Этот метод исследования обнаружили несколько десятков лет назад. Действительно первое поколение ИФА было не таким чувствительным, что требовало многократной сдачи анализов в разные сроки. Ведь только большая вирусная нагрузка помогала выявить ВИЧ ИФА. Это было не очень удобно, приходилось долгое время жить в волнении и постоянном страхе за свое здоровье.
Поэтому ИФА не стоял с тех пор на месте. Даже сейчас он продолжает развиваться, искать новые возможности для более быстрого и точного исследования и выявления вируса. Это поможет обнаружить его в более краткий срок после заражения и начать раньше принимать препараты для его подавления.
На данный момент существует уже 4 поколения ИФА. Чем выше поколение, тем более точным и быстрым будет анализ. Современные анализы ИФА помогают выявить антиген р24, который появляется раньше антител вируса. Именно это позволяет увидеть проявление вируса раньше, чем это было в прошлые годы. Возможно через некоторое время появятся еще несколько поколений, которые смогут выявить ВИЧ уже в начале заражения.
Если анализ ИФА положительный
В случаях, когда ИФА на ВИЧ положительный, не стоит впадать в паническое состояние. Возможно человек не прислушался к советам по подготовке перед сдачей анализа или он переболел острой вирусной инфекцией. Именно это может дать такие нежеланные положительные результаты.
В такой ситуации назначают дополнительный повторный тест с другими методами исследования. Часто применяют метод иммуноблотинга, когда ищет антитела к индивидуальным белкам вируса. Достоверность такого исследования довольно высока и позволяет с точностью сказать о присутствии или отсутствии вируса в организме.
Подготовка к ИФА
Чтобы ИФА тест на ВИЧ получился правдивым и точным, желательно прислушиваться к советам врачей по подготовке к анализу. Это помогает избежать ложноположительных результатов и лишних ненужных волнений. Поэтому важно заранее подготовить организм.
Не рекомендуется принимать алкогольные напитки непосредственно за сутки перед сдачей теста. В идеале для этого желательно несколько дней. Также не стоит слишком плотно наедаться перед тестом. Последний прием пищи возможен за 8 часов до сдачи крови на исследование. Обычно сдают ее утром, поэтому последний прием пищи приходится на ужин. А утром кровь сдают уже натощак.
Если человек переболел острым вирусным заболеванием, достоверность его анализов резко уменьшится. Желательно посоветоваться с врачом по этому поводу или сделать тест несколько позже, когда организм полностью освободится от остаточного явления острой вирусной болезни. Но в случае повторного теста могут использовать другой метод, позволяющий достоверно проверить наличие или отсутствие вируса.
Беременность и ИФА
Беременные женщины обязательно сдают некоторые анализы и среди них ИФА анализ на ВИЧ. Но это время имеет свои особенности, ведь беременность может влиять на точность результатов по ВИЧ. Именно поэтому, казалось бы здоровая женщина, получает положительный анализ на ВИЧ.
Но не стоит отчаиваться и волноваться за свое здоровье и самочувствие будущего ребенка. Такие ложные анализы могут быть не по вине сотрудников лаборатории, а из-за особенного состояния матери. Некоторые проходящие в это время процессы в ее организме существенно влияют на результат.
Бывает, что организм женщины воспринимает тело малыша как инородный предмет и начинает вырабатывать на него антитела. Если срок довольно маленький, а антител уже много, то часто могут происходить выкидыши. Поэтому желательно становиться на учет в самом начале беременности.
Также в это прекрасное для женщины время ее организм несколько слабеет, иммунная система тоже, а хронические заболевания этим пользуются, стараясь сильнее воздействовать на здоровье.
Из-за таких ситуаций и возникают ложноположительные результаты. Но не стоит волноваться. Достаточно сдать анализ еще раз и все выяснится.
Где сдавать анализ на ВИЧ
Так как метод исследования ИФА распространенный, то его применяют в каждой лаборатории. Поэтому выбор места для сдачи крови на ВИЧ каждый выбирает себе самостоятельно. Необходимо лишь узнать время приема анализов и адрес.
По желанию можно посетить Центр СПИДа и сдать тест именно там, ведь работа этого учреждения направлена именно на это заболевание и решение проблем с ним. Исследование в нем ничем не отличаются от исследований в других лабораториях.
В среднем для получения анализа необходимо около 5 дней. Но некоторые лаборатории могут делать его за 3 дня. Стоит понимать, что возможны случаи, когда ответ затягивается на больший срок. Но это не означает, что результат обязательно будет положительным. Возможно ккая-то ситуация в лаборатории или большой наплыв анализов не позволяют сделать это быстро.
Если анализ ИФА получился положительным, то назначают повторный анализ. Так делают всегда, чтобы исключить возможные ошибки со стороны пациента и человеческий фактор медицинских сотрудников. В этом случае исследования могут проводить другим методом.
Если же при повторном анализе получился положительный результат, то стоит обратиться к врачу. Он назначит соответствующее лечение и будет прослеживать состояние инфицированного. Препараты и дозировка подбираются индивидуально для каждого. Все зависит от вирусной нагрузки и особенностей организма.
Если анализы вызывают сомнение, человек может сдать их в нескольких лабораториях и затем при получении результатов сравнить. Но случаи ошибки довольно редкие и в основном результаты достоверны. Если у одного партнера был выявлен ВИЧ, то другому желательно тоже пройти исследование.
При правильном лечении, подавляется распространение вируса и человек может спокойно жить дальше. Если он не расскажет о своем заболевании, то никто этого и не узнает, ведь врачи не имеют права раскрывать врачебную тайну. Но желательно обезопасить своих близких и родных, принимая все меры безопасности.
Анализ на ВИЧ методом ИФА: точность, достоверность
Вирус иммунодефицита человека - серьезный диагноз. Ошибки при диагностике могут привести к плачевным последствиям. ИФА на ВИЧ - наиболее доступный метод исследования. Следует разобраться, насколько он эффективен.
Что такое ИФА
ИФА - иммуноферментный анализ. Задача метода ИФА - выявление антител или специфических антигенов в биологическом материале. С помощью метода можно отследить присутствие в жидкости вирусов и других крупных молекул. Исследование применяется в пищевой промышленности, сельском хозяйстве, различных областях медицины. Иммуноферментный анализ широко используется при диагностике ЗППП. Он помогает выявить ВИЧ и другие инфекции, передающиеся половым путем. В этом случае используется метод «сэндвич» - это вариант ИФА для выявления антигенов.
«Антиген-антитело» - название системы определяющей наличие антител, которые служат индикатором проникновения чужеродной молекулы. Чтобы выявить эти «метки», биологический компонент обрабатывают ферментами. Иммуноферментный анализ определяет антитела с точностью%, погрешность незначительна. Она составляет 2 - 4%.
ИФА - метод диагностики ВИЧ
I. ИФА анализ на ВИЧ - это первый этап диагностики. Наибольшая концентрация клеток вируса наблюдается в крови инфицированного человека. Антигенами вируса иммунодефицита являются протеины p24, p15, p17, p31 и гликопротеины gp 41, gp55, gp66, gp120, gp160. Чтобы обнаружить вирусный белок берут порцию крови из вены. Образец, направленный на исследование крови ИФА обрабатывают иммуноферментными реагентами. Кровь сдают строго натощак. За 2 дня до анализа не рекомендуется есть жирную пищу и употреблять алкоголь. Следует за 14 дней прекратить прием противовирусных препаратов.
Из крови выделяют сыворотку. Ее наносят на специальный планшет с множеством небольших лунок (96 шт). К биологическому материалу добавляют вирусный белок. Планшет несколько раз промывают ферментами. Если в ходе такой обработки начинают вырабатываться антитела и антигены, значит, в крови уже присутствовал вирус.
Преимущества метода ИФА:
- сравнительно небольшая стоимость;
- высокая стабильность реагентов;
- чувствительность;
- проводится в короткий срок;
- минимальное влияние человеческого фактора.
Современные тест-системы для ИФА производят по мировым стандартам. Это повышает точность метода.
После попадания вируса в кровь начинается латентная (скрытая) стадия развития. Период, пока опасные молекулы не начали размножаться, и антитела еще не сформированы, называют «время серонегативного окна». Делать тест на ВИЧ на этом этапе бессмысленно. Если заражение произошло, результат будет ложноотрицательным. Как быстро вирус себя обнаружит, зависит от того, какое количество опасных клеток попало в организм. При незащищенном половом акте или переливании зараженной крови этот срок будет минимальным. Для высокой достоверности ИФА на ВИЧ исследование проводят трижды. Сроки сдачи ИФА на вирус иммунодефицита человека:
- через 6 недель,
- через 3 месяца,
- спустя полгода.
ИФА 4 поколения на ВИЧ - метод, наиболее информативный на ранних сроках заражения. Его можно проводить уже через 1 месяц после предполагаемого инфицирования. Тест на ВИЧ 4 поколения является дорогостоящим по сравнению с аналогом 3-го поколения. Поэтому в государственных медучреждениях он используется как дополнительный метод диагностики. Бесплатно проводится тест 3, если по его итогам однозначного ответа дать нельзя, терапевт направляет на ИФА 4 поколения.
Важно! Сразу после инфицирования человек становится заразным. Он опасен для окружающих, даже когда еще не знает о своем диагнозе!
II. Если при ИФА выявлены антигены ВИЧ, необходимо проводить дополнительные исследования. К таким относится полимеразная цепная реакция (ПЦР). Достоверность этого метода 80%. С помощью ПЦР исследуют кровь, сперму и влагалищные выделения. Биологическую жидкость расщепляют в медицинском реакторе, затем подвергают обработке ферментами. В итоге получают данные о том, какова концентрация клеток ВИЧ в жидкой среде. Из-за большой погрешности (20%) при положительном результате дополнительно проводят иммунныйблоттинг.
III. Следующий этап диагностики - тест Комбо (или иммунный блоттинг). Это высокочувствительное исследование (98% достоверности), которое проводят, если через 6 месяцев результаты ИФА неоднозначные.
Расшифровка результатов ИФА
Даже если при первичном и повторных ИФА итог был положительным, человека нельзя признать инфицированным. Возможна погрешность при тесте на ВИЧ. Причины ложноположительного результата:
- хронические заболевания,
- длительные инфекционные заболевания,
- беременность.
Если при проведении иммуноблоттинга на ВИЧ результат положительный (реактивный), человек считается ВИЧ-инфицированным, а отрицательный тест значит, что он здоров. Реактивность или вирусная нагрузка при ВИЧ характеризуется количеством антигенов в единице крови. Нормой считается количество антител к вирусу от 5000 доклеток. Если цифра находится в этих пределах, либо меньше, вирус неактивен. Даже в случае дальнейшего подтверждения позитивного ВИЧ-статуса, человек не заметит перемен в состоянии здоровья долгое время (лет). Если реактивность менееклеток, это близко к норме. Когда их число увеличивается, следует незамедлительно начинать противовирусную терапию.
Время расшифровки составляет от 24 до 48 часов. Если необходимо получить информацию срочно (требуется хирургическое вмешательство) срок сокращается до 2-х часов. В провинциальных медицинских пунктах не всегда есть необходимые реагенты. Пробу берут по месту обращения, затем ее передают в областной центр. При таких обстоятельствах итог можно узнать через 1- 2 недели.
Результат иммуноферментного анализа представляет собой таблицу, в которой перечислены антитела и антигены. Напротив каждого стоит пометка «+» или «-». Иногда указывают количественный показатель в единице крови.
Отдельной графой идет индекс авидности антигенов. Цифра в процентах дает понять, когда начался процесс развития инфекции.
Что делать при положительном ИФА
Иммуноферментный анализ 3-го и 4-го поколения показывает с высокой достоверностью (98%), что человек здоров. Для подтверждения положительного ВИЧ-статуса его не достаточно. Если при первом и повторных тестах в крови обнаружены антигены ВИЧ, человек получает направление на иммуноблогинг. Когда в ходе исследований, выясняется, что человек имеет ВИЧ-позитивный статус, ему следует обратиться к врачу. Он определит вирусную нагрузку и после постановки на учет, подберет терапию. Клетки вируса со временем адаптируются к назначенным препаратам. Чтобы контролировать эффективность лечения тест ИФА проводят периодически.
Иногда иммуноблогинг показывает ложноотрицательный результат. Крайне редко вирус иммунодефицита 6 месяцев (и более) не проявляет себя. Это возможно, если в кровь попало незначительное количество клеток вируса. В 0,5% от общего числа случаев диагностировать заражение удается лишь через год. В 99,5% в течение полугода при проведении ИФА получится достоверный результат. Даже при проведении высокоточных исследований остается вероятность ошибки, составляющая 2%. Не следует забывать о человеческом факторе. Людям свойственно ошибаться. Для того чтобы ее исключить, тест можно провести в 2-х разных учреждениях.
А зачем вообще мне проверяться на ВИЧ?
Тестирование на ВИЧ — это единственный способ определить есть ли у Вас ВИЧ или нет. Когда Вы знаете свой ВИЧ-статус, Вы уверены в своём здоровье и знаете, что не заразите своего любимого. Чем раньше выявлен ВИЧ, тем раньше можно начать лечение и сохранить своё здоровье.
Обязательно сдайте анализ на ВИЧ, если:
- у Вас было соитие без барьерной защиты,
- Вы пользовались использованным иглой, шприцем,
- у Вас был рискованный контакт и это Вас очень беспокоит. Лучше один раз провериться, чем долго мучаться от страха неизвестности.
Многие люди боятся сдать тест на ВИЧ, а зря. Лучше сдать и знать о своём ВИЧ-статусе, чем напрасно переживать (если ВИЧ минус) или заражать других (ВИЧ плюс).
Почему не надо бояться сдать анализ на ВИЧ?
- Это очень легко и быстро. Провериться на ВИЧ легко и быстро можно с помощью экспресс-теста слюны или крови.
- Лучше знать. Это нормально бояться сдавать на ВИЧ. Но нужно пересилить себя и поставить точку в этом, это намного лучше, чтобы или забыть об этом (при условии исключения рискованного поведения) или начать немедленно лечение при положительном результате.
- Поможет прожить долгую и счастливую жизнь. Если у тебя обнаружат ВИЧ на ранних стадиях, то жизнь не кончилась, а наоборот только начинается + можно рано начать терапию и избежать СПИДа. При правильном лечении и уходе, человек инфицированный ВИЧ может прожить жизнь качественно, как средний ВИЧ-негативный.
- Лечение бесплатно. Если у тебя выявят ВИЧ, то ты будешь получать бесплатно дорогостоящие лекарства, которые снизят и укрепят иммунную систему.
- Здоровая половая жизнь. Если ты будешь знать свой статус и ВИЧ результат твоего партнёра, то ты будешь спокоен за ваши половые отношения соития. Вы ничем друг друга не заразите.
Да не оскудеет рука дающего
Проект «СПИД.ВИЧ.ЗППП.» — некоммерческий, созданный добровольцами-экспертами в области ВИЧ/СПИДа за счет своих собственных средств, чтобы донести правду людям и быть чистыми перед своей профессиональной совестью. Будем благодарны за любую помощь проекту. Да воздастся Вам в тысячи крат: ПОЖЕРТВОВАТЬ .
Краткая история тестирования на ВИЧ.СПИД
1981 г. — первый случай СПИДа.
1984 г. — выявление ВИЧ.
1985 г. — сертифицирован первый тест на ВИЧ.
1987 г. — создана первая тест-система Вестерн Блот.
1992 г. — внедрен первый быстрый тест.
1994 г. — создан первый тест определения ВИЧ по слюне.
1996 г. — первый домашний тест и тест определяющий ВИЧ по моче.
2002 г. — первый экспресс тест на ВИЧ из пальца.
2004 г. — первый экспресс тест определения ВИЧ в слюне.
Когда надо обязательно провериться на ВИЧ?
Обследоваться на ВИЧ можно в любое время, особенно, когда был контакт с ВИЧ-положительным человеком или неизвестно болеет она/она ВИЧ-инфекцией или нет.
Если даже Вы думаете, что у Вас не было риска заразится ВИЧ — обследуйтесь хотя бы 1 раз в год. Это нисколько не помешает и Вы сами будете спокойны и уверены.
Как правильно называется анализ крови на ВИЧ?
ИФА, Иммуноблот, ПЦР.
У меня был риск заражения ВИЧ, когда сдавать анализы?
Если у Вас было незащищенное соитие или Вы пользовались использованным шприцем, иглой (даже если она «стерилизованная»), то не медлите и как можно быстрее обратитесь к врачу для определения риска заражения ВИЧ и назначения анализов и .
Прошло 2 недели после контакта с ВИЧ-инфицированным
Прошёл месяц после рискованного контакта человеком у которого может быть ВИЧ
Подойдет метод ИФА с помощью тест-систем 4-го поколения.
Если Вы уверены, что заразились (что, обычно, в 99% неправда), помни, что человек инфицированный ВИЧ больше всего заразен и представляет опасность для своих контактных именно в ранние стадии ВИЧ-инфекции . Поэтому соблюдайте меры безопасности: или воздерживайтесь от соитий, психоактивных веществ или .
Через сколько времени можно сдать последний анализ на ВИЧ, что бы быть уверенным на 100%, что не заразился ВИЧ?
Сдать последний раз на ВИЧ, забыть и впредь думать головой:
- ИФА 4 поколения - 6 недель от предполагаемого риска;
- ПЦР РНК ВИЧ - 4 недели от предполагаемого риска;
- ИФА 3 поколения - 12 недель от предполагаемого риска.
Какого поколения был мой тест на ВИЧ?
Для Российской Федерации - обычно четвертого (для Беларуси, Украины — 3-го). В названии теста 4 поколения обычно присутствует что-либо из слов: «Combo», «At/Ag», «АТ/АГ», «антиген-антитело» или «p24». В любом случае, чтобы не гадать - узнайте точно у медработника . Вам обязаны предоставить данную информацию.
Я думаю, что у меня НЕ было риска заразиться ВИЧ, нужно ли мне тестироваться на ВИЧ?
По крайней мере 2 раза в год нужно обследоваться на ВИЧ и другие венерические заболевания, чтобы вовремя заметить болезнь и её вылечить и для уверенности — так спокойнее.
Я беременная, нужно ли мне обследоваться на ВИЧ?
Обязательно! Скорее всего тебе предложат сдать на ВИЧ уже в женской консультации или роддоме. Не отказывайся! Это важно для здоровья твоего ребенка . Если врач будет знать, что Вы ВИЧ-положительная, то он сможет помочь защитить ребёнка от заражения ВИЧ .
А можно ли узнать есть ли ВИЧ-инфекция без анализов?
Возможно с большой долей вероятности поставить диагноз «ВИЧ-инфекция», но ТОЛЬКО в стадии СПИДа. До СПИДа также можно ЗАПОДОЗРИТЬ ВИЧ-инфекцию. До стадии вторичных проявлений, СПИДа, особенно в латентной стадии ВИЧ-инфицированный будет выглядеть как обычный человек !
Как работают диагностические тест-системы для определения ВИЧ, СПИДа?
3-е поколение тестов (ИФА антитело)
Когда человек заражается ВИЧ, то в его организме вырабатываются антитела (защитники, специальные белки, которые атакуют вирус). Антительный ИФА тест определяет эти антитела в крови, слюне и моче. Если она находит антитела, это означает, что человек заражен ВИЧ. Этот тест точен только через 3 месяца после заражения, т.к. организму требуется время, чтобы выработать необходимый уровень антител, который сможет увидеть тест.
Что такое антитела?
Антитела - это белки иммуноглобулины, которые связываются с бактериями и вирусами и нейтрализуют их. Каждое антитело специфично, т.е. оно связывает и нейтрализует только один вид бактерий или вирусов и не действует на другие. Антитела у человека вырабатываются клетками крови - В-лейкоцитами.
Антитело - это белок (иммуноглобулин), который циркулирует в плазме крови и связывается с антигеном, вызвавшим его образование.
Что такое антигены?
Антиген - любое вещество (чаще белок, но может быть и углевод), вызывающее выработку антител лимфоцитами. Белки и другие вещества на поверхности любых «не своих» клеток рассматриваются как антигены и вызывают сходный специфический ответ, т.е. продукцию антител.
В случае с ВИЧ антигенами являются белки вируса .
4-е поколение тестов (Комбинированный антиген-антитело ИФА)
Тесты 4-го поколения также обнаруживают антитела (белки иммунной системы человека, которые вырабатываются в ответ на инфекцию), но и также антиген p24, поэтому определяют наличие ВИЧ раньше, чем тесты ИФА 3 поколения.
Антитела вырабатываются организмом в ответ на ВИЧ-инфекцию, но на их выработку нужно некоторое время («период окна»).
p24 антигены — это частицы самого вируса ВИЧ, их очень много находится в крови в первые несколько недель после инфицирования ВИЧ, именно, в эти первые несколько недель ВИЧ-инфицированный максимально заразен.
Антиген ВИЧ p24, который обычно и определяют тест-системы, это белок вирусного капсида (core компонент), суть - непосредственно кусочек вируса, понятно, что он начинает определяться в крови ранее, чем антитела. Т.е. «период окна» для теста 4 поколения совсем небольшой.
Когда же начинают обнаруживаться в большом количестве и антитела против ВИЧ, спустя некоторое время, то антиген p24 часто уже не выявляется, т.к. образуется комплекс между антигеном и антителами в крови, белок становится связанным с другим белком.
Тесты 4-го поколения могут выявить вирус ВИЧ через 11 дней — 1 месяц после заражения. Доказательства:
- «The detection of acute HIV infection» J Infect Dis. 2010 Oct 15;202 Suppl 2:S270-7. Cohen MS, Gay CL, Busch MP, Hecht FM. — 17 дней ;
- «How can we better identify early HIV infections?» Rosenberg NE, Pilcher CD, Busch MP, Cohen MS. — 5-10 дней после возможности детекции методом ПЦР (7-10 дней);
- «Diagnosing acute HIV infection» Expert Rev Anti Infect Ther. 2012 Jan;10(1):31-41. Yerly S, Hirschel B. — 20-25 дней для систем 3 поколения, и на 4 дня менее для систем 4 поколения (медианное значение, диапазон 2-14 дней ).
Лабораторные ИФА-системы 4 поколения с очень высокой вероятностью «не пропустят» ВИЧ-инфекцию уже через месяц поле инфицирования.
Быстрые (экспресс) тесты
С помощью быстрых тестов результат на ВИЧ можно получить, где угодно на месте, даже в домашних условиях, НО … вероятность ложноположительного результата при использовании быстрых тестов намного выше, п.э. всё равно потом нужно переделывать на нормальных.
Наборы быстрых тестов для определения заражения ВИЧ.
Самотестирование
Для того, чтобы определить наличие ВИЧ у себя в домашних условиях, нужно купить в аптеке быстрый тест на ВИЧ. Обычно, в аптеке продаются тесты для определения ВИЧ по слюне, очень удобные. Точно следуй инструкции по применению теста. В случае положительного результата срочно обратись в .
Как сдать анализ на ВИЧ?
Существует несколько учреждений, где можно пройти тестирование на ВИЧ. Можно сделать анализ в поликлинике по месту жительства. Для этого необходимо обратиться к участковому терапевту. Анализ проводится методом ИФА (иммуноферментный анализ) . Результат готов обычно в течение 7 — 14 дней .
Пройти тестирование на ВИЧ можно в Центре по профилактике СПИД , если таковой имеется в Вашем городе. Здесь Вы можете сдать кровь анонимно, не предоставляя свои персональные данные. Результат будет готов в период от 2 до 7 дней (возможно, уже на следующий день).
В данных учреждениях анализ на ВИЧ проводится бесплатно . В частных медицинских центрах можно пройти тестирование на ВИЧ на платной основе. Здесь преимуществом является то, что анализ готов уже в течение нескольких часов-первых суток .
Возможно проведение исследования даже в домашних условиях с использованием экспресс–тестов , которые сейчас продаются в аптеках на территории Российской Федерации. С точки зрения здравого смысла это не лучший вариант, так как получив отрицательный результат, вы не можете быть 100% уверенными в том, что у Вас нет ВИЧ, а если он будет положительным, необходимо будет перепроверить его другим методом (ИФА), так как есть вероятность получения ложноположительного результата.
Новый алгоритм определения ВИЧ.
Что такое ложноположительный и ложноотрицательный результат при исследовании на ВИЧ?
Ложноположительный результат
Ложноположительный результат (когда инфекции в организме нет, а результат теста положительный), можно получить по ряду причин. Некоторые, так называемые, аутоиммунные заболевания (ревматоидный артрит, системная красная волчанка , склеродермия и др.), аллергические заболевания в активной фазе, беременность, гормональные расстройства, острые инфекционные, онкологические заболевания, резко повышенные показатели компонентов крови (холестерин), недавно проведенные прививки могут приводить к появлению антигенов в крови человека, которые вследствие высокой чувствительности может «уловить» тест – система. Кроме того, к получению ложного результата может банально привести ошибки медицинского персонала,«человеческий фактор» :
- неправильно промаркировали пробирки,
- ошиблись при внесении образца во время проведения анализа,
- ошибки при документировании
- перепутали пробирки,
- не тому выставили результат,
- загрязнили пробу и т.д.
Ложноотрицательный результат
Ложноотрицательный результат (ВИЧ – инфекция есть, но результат теста отрицательный). Одна из частых причин получения такого результата – период « ». Другая причина – несостоятельность иммунной системы человека либо в конечной стадии заболевания – стадии СПИД, либо при приеме иммуносупрессивной терапии – после трансплантации органов, а также при иммунодефицитах. В этом случае иммунная система человека просто не в состоянии вырабатывать антитела к ВИЧ, которые определяются при проведении тестирования. Не исключены и факторы технического характера – погрешности при хранении и транспортировке сданной на анализ крови, при проведении анализа.
Что такое антитела к ВИЧ?
Что такое период серологического окна (сероконверсии)?
Это период времени после заражения человека ВИЧ, когда вирус в крови присутствует и нередко в очень больших количествах, а антитела к вирусу иммунная система еще не успела наработать. У таких людей результат исследования на ВИЧ методом ИФА будет отрицательным, так как этот метод определяет антитела к ВИЧ в крови. Обычно антитела у большинства инфицированных людей появляются в крови в течение трех месяцев после заражения, у малого процента людей – через 6 месяцев, у единиц – в срок до года.
Что сдают для анализа на ВИЧ?
Для тестирования на ВИЧ методом ИФА берется кровь из вены. При использовании экспресс – тестов возможно использование крови из пальца, слюны и мочи.
Как подготовиться к сдаче анализа на ВИЧ?
Сдавать анализ на ВИЧ нужно натощак, так как некоторые вещества, поступающие в кровь после приема пищи, могут повлиять на точность тест – системы. Так, если в крови резко повышаются холестерин и липиды после употребления жирной пищи, это может привести к искажению результатов.
Какими методами лучше делать анализ крови на ВИЧ?
При первичном обращении пациента кровь исследуется методом ИФА. Его преимуществами являются очень высокие специфичность (то есть выявляются антитела только к вирусу иммунодефицита человека и к никаким другим) и чувствительность (определяются даже самые малые концентрации антител к ВИЧ).
Существуют так называемые экспресс- тесты для экспресс анализа на ВИЧ. Они основаны на методе иммунохроматографии. Для диагностики заражения ВИЧ этим методом можно использовать цельную кровь из пальца, слюну. Но достоверность этих быстрых тестов ниже, чем ИФА.
Частота ложноположительных результатов при их использовании достигает 1% . Согласно санитарным правилам «О профилактике ВИЧ — инфекции», исследование на антитела к ВИЧ с применением быстрых тестов должно сопровождаться обязательным исследованием той же порции крови с помощью стандартных лабораторных технологий, разрешенных к применению в Российской Федерации.
Диагностировать заражение ВИЧ можно и методом , но не рекомендуется, т.к. очень дорогой, более длительный и технически более сложный, чем ИФА, что предполагает большие риски ошибок. Тестирование пациента при первом его обращении проводится всегда методом ИФА, так как он более прост в исполнении, не требует больших затрат времени и особых условий (ПЦР – лаборатории), но достаточно достоверен. Однако использование ПЦР позволяет диагностировать инфицирование в период серологического окна, начиная с 10 – 14 дня заражения . Следует учитывать и то, что чувствительность ПЦР достигает 98%, что ниже, чем у ИФА (более 99,5%). К тому же, анализ методом ПЦР платный и стоит недешево. Оптимальный вариант диагностики – метод ИФА с использованием тест – систем 4 поколения с определением и антител к ВИЧ, и р24 антигена. Это позволяет получить достоверный результат в период сероконверсии.
Почему задерживают результат анализа на ВИЧ?
Выдача результата на ВИЧ задерживается в том случае, если был получен положительный результат исследования на ВИЧ. Дело в том, что в диагностике ВИЧ -инфекции существует определенный алгоритм. Если получен положительный результат, та же порция крови должна быть исследована в другой тест-системе другого производителя или формата теста. При получении повторного положительного результата проба исследуется в тест-системе опять же другого производителя или другого формата. При получении третьего «плюс»-результата, кровь передается для исследования в реакции иммунного блоттинга.
Что представляет собой тест иммунного блоттинга?
Это разновидность ИФА, где определяются не антитела ко всем компонентам ВИЧ, а антитела к конкретным белкам вируса. Суть в том, что вирус имеет в своем составе различные белки: оболочки, сердцевины и ферментные белки. На стрипе (полоске, похожей на тест на беременность) эти белки нанесены в виде полос. При взаимодействии с сывороткой инфицированного человека в результате ряда реакций эти полосы становятся видимыми. Если сыворотка не содержит антител к ВИЧ, то полоска остается чистой. Этот метод является референтным, те есть по его результатам в совокупности с клиническими проявлениями и эпидемиологическими данными (при наличии рисков заражения, незащищенные контакты, использование инъекционных наркотиков и др.) выставляется диагноз «ВИЧ – инфекция».
Почему после получения отрицательного результата на ВИЧ рекомендуют сдать кровь еще раз через 2- 3 месяца?
Чтобы исключить сдачу крови в период серологического окна. Нужно отметить, что в настоящее время для ИФА – диагностики используют тест системы 4 поколения, в которых определяются не только антитела к ВИЧ, но и антиген p 24, который появляется в крови с конца второй недели заболевания и является показателем размножения ВИЧ в крови. Это снижает вероятность получения ложноотрицательного результата.
График динамики появления маркеров ВИЧ.
Когда появляются маркеры ВИЧ, «период окна».
Как интерпретировать результат анализа на ВИЧ?
Отрицательный результат на ВИЧ
Если Вы сдавали кровь на ВИЧ методом ИФА, то результат «отрицательный» означает то, что у Вас не обнаружено антител к ВИЧ . Это свидетельствует либо о том, что Вы не инфицированы вирусом иммунодефицита человека , либо о том, что антитела в крови после встречи с ним не успели выработаться иммунной системой .
Что предпринять в этом случае, чтобы устранить все сомнения?
Пересдать кровь этим же методом через два – три месяца, что практически исключит заражение в случае получения отрицательного результата. Если же Вы человек тревожный, то третий повтор анализа еще через полгода означает, что у Вас нет ВИЧ в крови (при отсутствии, конечно же, рисков заражения в течение этого интервала времени).
Положительный результат на ВИЧ
При получении положительного результата либо формулировки «антитела к ВИЧ обнаружены» , необходимо не останавливаться на данном этапе и обязательно продолжить обследование по нескольким причинам.
- Во–первых, есть вероятность получения ложноположительного результата. Возможно, у Вас имеются хронические заболевания, беременность или другие факторы, которые могут повлиять на процесс тестирования крови. Чтобы избежать ошибок в диагностике, имеется алгоритм исследования первично-положительной крови, состоящий из нескольких этапов.
- Во-вторых, если Вы действительно инфицированы ВИЧ, то качество Вашей жизни напрямую зависит от своевременного начала противовирусной терапии. Уже доказано, что при начале лечения в стадии острой ВИЧ – инфекции, продолжительность жизни ВИЧ – инфицированного пациента приближается к средней ее продолжительности у здорового человека.
Когда много лет назад мне поставили диагноз «ВИЧ-инфекция», то я думал, что теперь он будет подчинять всю мою жизнь. Но сегодня для меня ВИЧ — это крошечный вирус, который Я контролирую, а не он меня.
— Алексей.
Я сдавал быстрый тест в мобильном кабинете анонимного тестирования и никак не ожидал, что тест покажет мне положительный результат. Я выл как раненая белуга: «Кто будет растить моих детей??!!! Сколько мне осталось жить??» Но мне повезло, мне попался очень классный врач, и он мне сказал, что он знает кучу людей, которые живут с ВИЧ по 20 лет и нормально себя чувствуют и даже рожают по несколько детей, и это помогло мне пережить этот стресс. Я буквально жил его словами первые несколько самых тяжелых месяцев. И сейчас со мной всё в порядке, у меня прекрасные дети, семья, работа!
— Саша.
Помни! Сейчас ВИЧ-инфекция лечится, жизнь не закончилась, а начинается новая, переосмысленная жизнь и ВИЧ — это не приговор, при условии правильного, регулярного лечения с помощью антиретровирусной терапии. Обязательно регулярно посещай врача СПИД-центра, дай ему возможность выполнить свою работу и помочь тебе. Не подавайся , это бедные, несчастные люди, которые оказались в глубокой яме и других туда тащут.
Также, заодно можно провериться и передающиеся половым путем: сифилис, трихомониаз, гарднереллез.
Где же Вам могут помочь в данной ситуации?
Если Вы сдавали кровь в поликлинике, Вас направят к врачу – инфекционисту. Если же анализ был сделан в частном центре анонимно или дома при помощи экспресс – тестов, Вы можете обратиться либо в Центр по профилактике СПИД, либо к инфекционисту в поликлинике по месту жительства. И помните, Ваша жизнь – в Ваших руках!
У кого обязательно берут кровь на ВИЧ?
- Больных наркоманией (в направлении на ВИЧ будет указан код 102),
- Тем, кому перелили кровь, компоненты крови (плазму, эритроцитарную массу) (код 110),
- Доноров крови, плазмы, (код 108),
- Больных , (код 104),
- Гомосексуалов, (код 103),
- Детей рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей, (код 124),
- Заключенных, (код 112),
- Контактных по гетеросексуальному половому(код 121), наркотическому пути передачи с ВИЧ+(код 123),
- Пилотов, бортпроводников и авиадиспетчеров, (код 118),
- Железнодорожников (машинисты, стрелочники, тот, кто пути и поезда обслуживает), (код 118),
- Призывников, военных, (код 111),
- Полицию, (код 118),
- Медицинских работников, врачей, (код 115)
- Иностранцев, (код 200),
- Беременные, (код 109),
- По клиническим показаниям с симптомами, болезнями похожими на СПИД, (код 113),
- Больные гепатитами В,С, (код 118),
- Умершие с подозрением на наличие ВИЧ (наркоманы, бомжи и т.п.), (код 118),
- коренные малые народы Севера (ненцы, ханты, манси, коми, зыряне и др.), (код 118-х),.
Тест 4-го поколения на ВИЧ позволяет определить наличие антител к вирусу иммунодефицита человека. Разработаны и используются несколько разновидностей тест-систем, обеспечивающих высокие результаты в ранние сроки инфицирования.
- Системы 1-го и 2-го поколений обладают ограниченными возможностями, устанавливая лишь присутствие антител к ВИЧ. Метод ИФА относится к косвенному определению недуга, т. к. не выявляет наличие самого вируса СПИДа.
- Второе поколение тест-системы фиксирует антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Основное положение работы ИФА третьего поколения – возможность определять Ig6 и IgM антитела к вирусу СПИДа.
- Для теста 4-го поколения на ВИЧ характерна возможность обнаружения не только антител, но и антигена p24. Системы ИФА используют в своей работе вирус, обработанный ультразвуком.
Больного, регулярно сдающего тест на ВИЧ, интересует точность результатов анализа. Тест устанавливает наличие антигена и антитела. Антигены выявляют через 30 дней после того, как определяется РНК в крови методом ПЦР.
Тест на ВИЧ 4-го поколения информативен для врача через 60 дней после заражения вирусом. Точность исследования и специфичность диагностики заключается в количестве, установленном тестом, отрицательных экземпляров.
Чувствительность теста определяется количеством положительных образцов. У 100 людей, инфицированных вирусом СПИДа, при наличии такого же количества положительных результатов чувствительность составит 100%. Особая информативность наблюдается у теста 4-го поколения, когда он выявляет отрицательный результат и не пропускает ни одного инфицированного больного.
Чувствительный тест применяют для скрининга, а специфические методы необходимо использовать для постановки точного диагноза. ИФА исследование относят к скрининговым методам: иммунолог определяет ВИЧ-заражение. Следует помнить, что 100%-ную гарантию точности не дает ни один тест.
Отличия между исследованиями 3-го и 4-го поколений на вирус иммунодефицита человека
Между двумя тест-системами существуют некоторые отличия. Антитела против вируса иммунодефицита человека выявляет 3-я система. Она не затрагивает изучение раннего периода болезни, когда человек представляет потенциальную опасность для партнера и может инфицировать других людей. Тесты 4-го поколения более совершенны, т. к. определяют антигены ВИЧ на ранних сроках заражения вирусом. Между тестированием ПЦР и исследованием 4-го поколения существует определенная связь: они оба имеют высокую чувствительность к возбудителю на ранней стадии инфицирования.
На законодательном уровне разрешено использование тестов 4-го поколения, или АГАТ. Эффективность исследования 3-го и 4-го поколений определяется с помощью сероконверсных панелей. Тест-система 4 определяет количество РНК ВИЧ. Во многих случаях выявляют высокую степень результатов. Показатели вирусного заражения соответствуют диапазону тест-системы 4.
У исследования 3-го поколения диапазон изучения концентрации вируса более узкий, чем у теста 4. Система последнего поколения доступна в использовании, не требует сложного программного обеспечения и обрабатывает в одном комплекте 250 образцов.
Показатели, которые определяет ИФА при ВИЧ-инфицировании
Точную дату заражения вирусом СПИДа определяют через многие месяцы и годы от момента инфицирования. Изучая несколько групп риска, удается добиться более раннего определения времени начала недуга. Чтобы не подвергать здоровье и жизнь опасности, следует ознакомиться со статусом партнера до начала контакта.
Пациентов интересует вопрос о точных сроках, устанавливаемых ИФА 4-го поколения, исключающих ВИЧ-инфекцию. Наибольшее количество антител вырабатывается на 3-4-й неделе от начала заболевания и резко уменьшается к 48-му дню от момента заражения. Тест 4-го поколения через 7 дней может указать единичные антитела в крови. Наиболее благоприятный срок для системы исследования – 30 дней, но официально установлен срок в 6-12 недель от начала риска для здоровья.
Пациенты, имевшие небезопасный контакт, делают анализ на 6-й неделе для исключения ВИЧ-инфицирования.
Период между 3-й и 6-й неделями наиболее опасен для передачи возбудителя, хотя заражение происходит на любой стадии развития вируса СПИДа.
ИФА надежен для диагностики спустя несколько лет после заражения. Сбой в работе системы наблюдается у пациентов в терминальной фазе болезни, имеющих яркую картину СПИДа.
Подтипы, выявленные ИФА, и их распространение
Точность теста настолько высокая, что невозможно не определить редкие подтипы вируса СПИДа. Скрининговая система теста 4-го поколения выявляет подтипы групп О и М. Группы P и N встречаются в единичном числе и могут быть обнаружены системой ИФА 4.
Современная система выявляет антитела к вирусам ВИЧ-2 и ВИЧ-1. Редкие подтипы СПИДа и группы N составляют 9 экземпляров. Подтип P, открытый ИФА 4, встречается в единичном экземпляре. Анализ был неоднократно положительным, характеризовался слабым иммунитетом. Вирус ВИЧ-2 методом ИФА не выделяется в более поздние сроки, т. к. антитела возникают в поле зрения для проведения исследования.
Используемый тест лучше лабораторного устанавливает ложный положительный результат. Тест 4-го поколения выявляют антиген ВИЧ, являющийся составной частью вируса, вызвавшего недуг. Период, при котором невозможно выявить возбудителя, ничтожно мал, а антиген ВИЧ p24 выявляют в крови намного раньше, чем антитела. В более позднее время белок p24 усилен выработкой антител.
Тест 4-го поколения обозначается как «p24» или «антиген-антитело». В некоторых случаях ИФА обнаруживает СПИД через 7 дней после заражения, но общие ориентиры составляют 14 дней – 1 месяц.
Схема проведения тестирования на ВИЧ-инфекцию
Для анализа берут незначительное количество крови из локтевой вены. Исследование проводят через 14 дней после даты предполагаемого опасного контакта. Достоверность результатов не подтверждает анализ ИФА через 3 месяца после инфицирования.
Необходимо заранее подготовиться к сдаче теста. Не следует употреблять пищу перед забором крови и принимать лекарственные средства. Анализ сдают в утренние часы, а после обеда можно узнать о сроках выдачи результата. Если ИФА положительное, необходимо выполнить тест на ПЦР и ВИЧ-инфекцию, т. к. существует вероятность 1% неправильных результатов теста 4-го поколения.
Врач информирует больного о том, что достоверный результат устанавливают через полгода после внедрения вируса в организм. Если данные анализа вызывают сомнение, необходимо вновь осуществить забор крови из вены через 1-2 недели.
Ложноположительный вывод делают при отсутствии вируса, хотя тест указывает на положительный результат. Ложноотрицательный результат – следствие проведения исследования в ранние сроки, через 90 дней с момента заражения ВИЧ-инфекцией.
Решение о проведении теста 4-го поколения принимается больным добровольно, а исследование полностью анонимно и бесплатно. Не допускается принудительный забор крови.
Обязательные случаи тестирования на СПИД с помощью тест-систем
Согласно документам, подтверждающим права человека, не разрешается принудительная сдача крови на ВИЧ-инфекцию. В обязательном порядке проводят анализ лицам, занимающимся донорством биологических жидкостей организма.
Кровь проверяют на вирус ВИЧ-1 и ВИЧ-2, а также на частицы ДНК вируса. После карантина сроком в 6 месяцев кровь вновь проверяют на вирус СПИДа. После получения отрицательного результата ее используют для переливания в медицинских учреждениях. Соблюдается алгоритм тестирования в скрининг-лаборатории. После первого положительного результата проводят двойное исследование с тем же тестом 4-го поколения. После двух положительных тестов исследование продолжают в референс-лаборатории.
Тест на ВИЧ проходят лица без гражданства и иностранцы, въезжающие в Россию. Люди, отбывающие наказания в тюрьмах, сдают анализ на ВИЧ-инфекцию в обязательном порядке.
СПИД – страшный недуг, приносящий ущерб здоровью многих людей. Своевременная диагностика болезни позволит сохранить здоровье и жизнь на долгие годы.
Какие тесты бывают на ВИЧ?Для выявления ВИЧ в некоторых ситуациях применяется качественный (т.е. есть или нет, без ответа на вопрос «сколкьо?») ПЦР РНК или ДНК ВИЧ, данный метод является на сегодня вспомогательным и его не следует использовать для скрининга ВИЧ-инфекции . У лиц с диагностированной ВИЧ-инфекцией применяется количественный метод ПЦР на РНК ВИЧ, он позволяет ответить на вопрос сколько вируса в крови. Его так же не следует применять для диагностики.
Чем лучше тесты 4 поколения? Чем отличается разные поколения ИФА?
Тесты 4 поколения детектируют ВИЧ-инфекцию раньше, так как «видят» не только антитела, как тесты 3 и более ранних поколений, но и антиген ВИЧ. Антитела вырабатываются органищзмом в ответ на ВИЧ-инфекцию, и на выработку нужно некоторое время. Антиген ВИЧ p24, это белок вирусного капсида (core компонент), суть - непосредственно кусочек вируса, понятно, что он начинает определяться в крови ранее, чем антитела - белки иммунной системы человека, которые вырабатываются в ответ на ВИЧ-инфекцию. Т.е. «период окна» для теста 4 поколения совсем небольшой. Когда начинают обнаруживаться в большом антитела против ВИЧ, антиген p24 часто уже не выявляется, вероятнее всего в результате образования комплекса между антигеном и антителами в крови. В случаях его обнаружения антиген p24 является высокоспецифическим индикатором инфекции.Время возникновения надежной положительной реакции для ИФА тест-систем первого (1), второго (2), третьего (3) и четвертого (4) поколений, методов ПЦР-диагностики (N). АГ - антиген ВИЧ p24, АТ - антитела к ВИЧ, E -эклипс-фаза, ранняя стадия внутриклеточной репликации вируса.
По Cornett JK, Kirn TJ, Clin Infect Dis. 2013 May 10
Подробнее смотрите новостную статью Современные методы диагностики ВИЧ .
Может быть так, что антиген уже связан антителами, а антител еще мало для теста?
Нет, если ВИЧ есть в организме, и если антитела смогли связать так много антигена, что АГ-линия теста его перестает видеть, то она однозначно уже выявит антитела к ВИЧ, и тест все равно будет положительный.
Какого поколения был мой тест?
Для Российской Федерации - четвертного, иных у нас не ввозится и не используется . В названии теста обычно присутствует что-либо из: «Combo», «At/Ag», «АТ/АГ» или «p24».
Какой период окна для тестов 4 поколения (Ag/At Combo)?
Тест-системы 4 поколения способны обнаружить не только антитела к ВИЧ, которые организм вырабатывает в ответ на инфекцию, но и непосредственно ВИЧ, посредством выявления вирусного белка p24. Белок p24 может быть определен очень рано, но его уровень в крови в период после инфицирования постепенно снижается, но одновременно с этим снижением нарастает уровень антител. Все люди разные, потому назвать точный 100% минимальный срок, когда сомневаться в тесте уже нет поводов - невозможно. Однако, на сегодня есть достаточное количество исследований, которые дают нам весьма определенные ориентиры, приведем лишь несколько из них:Я слышала, что методом ИФА ВИЧ-2 выявляется позднее, это так?
В данном случае это не имеет значения, антитела выходит на уровень достаточный для детекции примерно в одни и те же временные рамках, общие перестраховочные сроки 6-8 недель от опасного контакта «накрывают» и ситуации с ВИЧ-1 и с ВИЧ-2.
Если ИФА положительный, то это означает диагноз ВИЧ-инфекции?
Нет, требуется подтверждение другим методом. Подтверждающим методом для диагностики ВИЧ-инфекции сегодня является непрямая иммунофлюоресценция (РНИФ, иммуноблот, вестерн-блот). Иммуноблот демонстрирует высокую чувствительность (99,3-99,7%) и специфичность (99,7%), но так как метод определяет иммунглобулины класса G, то с момента инфицирования результат может быть ложноотрицательным до трех недель.
Аптечные ИФА экспресс-тесты достаточно надежны?Экспресс-тесты на антитела к ВИЧ в США одобрены с 2002 года, в том числе ультрабыстрые тесты, чувствительность таких тестов от 93% и специфичность - от 99%. Одобренный и доступный в РФ экспресс-тест Alere Determine HIV 1/2 Ag/Ab Combo, значительно уступает по способности к обнаружению антигена р24 ВИЧ по сравнению с коммерческими лабораторными системами 4 поколения. В одном исследовании (n=26) экспресс-тест Alere Determine выявил антиген в 62% случаев, а в другом (n=67) - в 86,6% случаев, в тестовых сыворотках без антител. В двух случаях с известной датой инфицирования Alere Determine дал положительный результат только по антителам к ВИЧ на 35 день. В ситуациях, где свежих потенциально опасных контактов не было экспресс-тестам вполне можно доверять, при отрицательном результате. Следует учитывать, что экспресс-тесты значительно чаще лабораторных дают ложный положительный результат. Положительный прогностический результат для РФ у экспресс-тестов будет примерно 50 на 50, т.е. если экспресс-тест дает положительный результат, то в среднем, т.е. для групп низкого риска, вероятность в данном случае наличия ВИЧ-инфекции лишь 50%, и любой положительный результат обязательно требует перепроверки методом ИФА в условиях лаборатории.
Можно ли применять ПЦР РНК или ДНК ВИЧ для скрининга на ВИЧ?
Да, можно. Нет, не рекомендуется. Хотя за последнее десятилетие метод стал значительно дешевле и точнее, но все же он до сих пор и дорог, более длительный, и технически сложен, что предполагает большие риски ошибок. В России, так же впрочем, как и США, количественный метод ПЦР не рекомендован для скрининга и диагностики ВИЧ-инфекции в обычных случаях.
Чем отличается ПЦР ДНК от ПЦР РНК ВИЧ?РНК обычно используется в количественных тестах дляоценки вирусной нагрузки у диагностированных лиц, например для оценки эффективности терапии. ДНК - в мононуклеарных клетках, например для диагностики у детей, там, где антитела к ВИЧ матерей мешает использовать метод ИФА. И тот и другой тест могут быть и количественными и качественными. И тот и другой можно в узких случаях применить как диагностический, с учетом конкретных ограничений, которые накладывают технические параметры системы.
Я сдавал в коммерческой лаборатории анализ ПЦР РНК (или ДНК) ВИЧ, могу ли я исключить инфицирование?
Да, скорее всего можете, но Вы делали это зря. Выше мы писали, что метод ПЦР не применяется для скрининга, а значит нужно делать ИФА.
Анализ крови на ВИЧ или тест на ВИЧ включает в себя несколько методов лабораторной диагностики, позволяющих выяснить присутствие вируса иммунодефицита (ВИЧ), обнаружить антитела к его белкам (иммуноглобулины) или антигены (белки вируса) в крови больного, слюне или моче. Вирусу иммунодефицита человека присуща уникальная антигенная изменчивость, что связано с большой скоростью транскрипции (размножения), в связи с чем затрудняется как диагностика ВИЧ-инфекции, так и ее профилактика.
В основе диагностики ВИЧ-инфекции, как и любого другого инфекционного заболевания лежит:
- эпидемиологический анамнез,
- характерные жалобы больного,
- клиническая картина заболевания,
- данные лабораторных методов исследования.
Как только диагноз ВИЧ-инфекции установлен, с целью уточнения характера течения основного заболевания и вторичных заболеваний проводится дальнейшее обследование больного и назначается соответствующее лечение.
Тяжесть заболевания оценивается по уровню концентрации вирусов в крови, количеству CD4-лимфоцитов и определению антигена р24.
Основные виды диагностики ВИЧ-инфекции
Вирусологическая диагностика основана на выявлении ВИЧ в тканях и биологических жидкостях больного.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) применяется с целью выявления вируса и оценки вирусной нагрузки, что позволяет судить об эффективности специфического лечения и прогнозировать течение инфекционного заболевания.
Серологическая диагностика ВИЧ-инфекции предполагает выявление антигенов вируса и антител в сыворотке крови. Обнаружение антител к с помощью ИФА (иммуноферментного анализа) является основным методом лабораторной диагностики. Все положительные результаты подтверждаются методом иммуноблоттинга. основан на выявлении антител в крови и биологических жидкостях исследуемого. Используются в случаях, когда необходимо быстро получить результат.
Уровень иммуносупрессии определяется методикой подсчета СD4 и СD8-лимфоцитов, с последующим определением соотношения CD4: CD8.
Каждый из лабораторных методов диагностики ВИЧ-инфекции характеризуется определенной чувствительностью (% верно определенных среди заведомо (+) образцов) и специфичностью (% правильно определенных тестов среди заведомо отрицательных образцов). Результаты теста на ВИЧ интерпретируются как отрицательные, положительные или сомнительные.
Рис. 1. На фото слева ВИЧ заражают иммунную клетку (обозначено желтым). На фото справа лимфоцит, поражённый ВИЧ. Вытянутые структуры на поверхности клетки вызваны гиперпродукцией белка.
Рис. 2. На фото зафиксирован процесс выхода (отпочкования) вирионов из инфицированной клетки.
Анализ крови на ВИЧ. Что надо знать
Анализ крови на ВИЧ может сделать любой житель нашей страны по своему желанию анонимно и бесплатно. Но есть категории лиц, которые обследуется на ВИЧ в обязательном порядке. К ним относятся:
- все доноры крови и ее компонентов, а также тканей и других биологических жидкостей;
- лица, которым была проведена трансфузия или осуществлена трансплантация (проводится в течение первых 3-х месяцев после проведения процедуры);
- беременные;
- лица, пострадавшие в результате аварии;
- лица, имеющие клинические показания — лихорадку, диарею, постоянный кашель и увеличение более 2-х групп лимфатических узлов, длящиеся более 1-го месяца, необъяснимую потерю веса, СПИД-ассоциированные и оппортунистические инфекционные заболевания, соматическая и онкопатология;
- иностранные граждане;
- лица из группы риска (наркоманы и страдающие венерическими заболеваниями).
Тест на ВИЧ необходимо проводить всем, кто был подвергнут риску заражения.
Рис. 3. Анализ крови на ВИЧ в нашей стране можно сдать анонимно и бесплатно.
Где сдать кровь на ВИЧ
Анализ на ВИЧ можно сдать бесплатно в учреждениях здравоохранения, работающих на бюджетной основе при наличии паспорта и медицинской страховки. Врачи при этом обязаны хранить врачебную тайну. Бесплатно и анонимно можно сдать анализ в Центрах профилактики и борьбы со СПИДом и там же получить врачебную консультацию до и после обследования. На платной основе проводится тестирование на ВИЧ в коммерческих лечебных учреждениях. Тест на ВИЧ может пройти любой человек, временно проживающий на данной территории.
В лаборатории будет сделан анализ крови на ВИЧ иммуноферментным методом (ИФА).
Анализ на ВИЧ анонимно
В государственных учреждениях здравоохранения (поликлиниках и больницах) анонимно сдать анализ крови на ВИЧ нельзя. Сведения о результатах исследования будут известны узкому кругу медиков, которые обязаны хранить врачебную тайну.
Кабинеты анонимного тестирования существуют на базах Центров СПИДа, где каждому исследованию присваивается номер.
Рис. 4. Пробирки с кровью отправляются на серологическое исследование.
Анализ на ВИЧ принудительно
Существует четыре группы населения, тестирование на ВИЧ которых является обязательным, но не насильственным:
- Доноры крови и другого биологического материала.
- При устройстве на работу в учреждения, где работник может иметь контакт с заведомо инфицированным материалом и больными.
- Иностранные граждане при получении виз для проживания (более 3-х месяцев) на территории РФ.
- При наличии клинических показаний лицам, находящихся в местах лишения свободы.
Принудительное тестирование населения на ВИЧ является бесперспективным и противоречит соблюдению прав человека. Принудительное тестирование населения в РФ является незаконным.
Рис. 5. Тестирование на ВИЧ осужденных проводится по клиническим показаниям.
Сколько стоит анализ на ВИЧ
В государственных учреждениях обследование на ВИЧ бесплатное, в частных клиниках — платное:
- Стоимость ИФА составляет от 400 до 800 руб. Ответ будет готов по истечении одних суток. Существует срочная диагностика, когда ответ можно получить в течение 2-х часов.
- Стоимость анализа на ВИЧ методом иммуноблота составляет от 3 до 5 тыс. рублей. Результат будет готов через 4 — 7 дней.
- Стоимость теста на ВИЧ методом ПЦР составляет 10 — 12 тыс. руб. Результат будет готов через 10 — 14 дней.
Сколько делается анализ на ВИЧ
В государственных учреждениях срок получения результатов анализа на ВИЧ составляет:
- При применении ИФА 3-го поколения результаты дают самый достоверный результат через 12 недель от момента предполагаемого инфицирования.
- При применении ИФА 4-го поколения — 6 недель.
- При применении ПЦР — 4 недели.
Как сдавать анализ на ВИЧ
- Сдавать анализ на ВИЧ необходимо не ранее, чем через 3 — 4 недели от предполагаемого заражения.
- Тестирование проводится не ранее, чем через 8 часов после приема пищи.
Из жидкости можно употреблять только обычную воду.
- Для анализа осуществляется забор 3 — 5 мл крови, взятой из локтевой вены, для чего используется обычный шприц или игла с помпой.
- До транспортировки в лабораторию сыворотка крови может храниться в холодильнике до 7-и дней. Без холодильника не более 30 минут после забора.
- Транспортировка пробирок с сывороткой крови осуществляется в специальных термоконтейнерах при температуре +4 — +8 о С.
Рис. 6. Для анализа на ВИЧ необходимо провести забор 3 — 5 мл крови, взятой из локтевой вены — для чего используется обычный шприц (фото слева) или игла с помпой (фото справа).
При заборе крови из вены вирусом иммунодефицита человека заразиться невозможно.
Ложноположительный анализ на ВИЧ и другие виды результатов исследования
Результаты анализа на ВИЧ могут трактоваться как положительные, отрицательные и сомнительные.
Сомнительный результат теста на ВИЧ получается при присутствии в сыворотке крови антител, которые перекрестно реагируют с белками вируса иммунодефицита человека. Анализ в данном случае сдается повторно, а при его проведении будут применяться белее специфичные тест-системы. Если сомнительный результат сохраняется, то тестирование необходимо проводить каждые 1 — 3 месяца в течение полугода.
Положительный результат теста на ВИЧ (серопозитивный) говорит о наличии в крови исследуемого антител к вирусу. В данном случае иммуноферментный анализ (ИФА) повторяется и при получении повторного положительного результата подтверждается тестом иммуноблотинга с тем же образцом крови.
Отрицательный результат теста на ВИЧ (серонегативный) говорит об отсутствии ВИЧ-инфекции, либо инфицирование произошло совсем недавно и в крови обследуемого еще не выработались антитела (период «окна»). В таком случае обследование следует повторить через 3 и 6 месяцев.
Ложноположительный результат теста на ВИЧ регистрируется тогда, когда его причиной явился не вирус иммунодефицита человека, а беременность, аутоиммунное заболевание, аллергия, любое другое инфекционное заболевание, недавно сделанная прививка, онкопатология, трансплантация органа и даже обычная еда (семечки, острая, жирная и кислая пища, употребленная накануне, и даже минеральная сильногазированная вода). Большое количество ложноположительных результатов получается при проведении тестирование в домашних условиях.
Ложноотрицательный результат теста на ВИЧ говорит о том, что вирус в крови больного присутствует, но антитела еще не выработались. При проведении анализа ПЦР ложноотрицательный результат может быть получен у ВИЧ-инфицированных больных в период проведения специфического лечения, когда концентрация вирусов в крови настолько мала, что приводит к несрабатыванию тест-системы. В большинстве случаев ложноотрицательный результат получается при технической ошибке или браке в тест-системе, что встречается крайне редко ввиду проведения жесткого контроля качества на всех уровнях.
Анализ на ВИЧ необходимо отложить минимум на две недели после перенесенного инфекционного заболевания или вакцинации.
Рис. 7. Проведение серологического исследования крови.
Тест-системы, определяющие наличие антител к ВИЧ
При помощи тестирования на антитела к вирусу иммунодефицита человека оценивается ответ организма на инфицирование. С этой целью применяется иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA), позволяющий обнаружить антитела к белкам вируса и подтверждающий анализ иммуноблотинг (вестерн-блот), при помощи которого определяется реакция антител на белки вируса.
Антитела к ВИЧ
Вирусы иммунодефицита человека обладают антигенными свойствами и при попадании в организм человека вызывают синтез антител — специфических иммуноглобулинов. С помощью современных тест-систем в сыворотке крови и других биологических жидкостях больного ВИЧ можно определить класс иммуноглобулинов (антител). Раньше всех (через неделю после инфицирования) появляются иммуноглобулины класса IgМ. Их рост отмечается в течение месяца и далее они сохраняются еще около 30 дней. Иммуноглобулины класса IgG циркулируют в крови несколько лет. Их выявление является показателем наличия ВИЧ-инфекции.
Антитела к ВИЧ появляются через 2 — 4 нед. после инфицирования и далее они определяются в крови на протяжении всего заболевания.
Период «окна» при ВИЧ
Антитела в организме инфицированного человека вырабатываются не сразу. На первых порах ВИЧ-инфекция ничем себя не проявляет. Антитела появляются в крови в среднем через 2 — 3 месяца от момента заражения (от 2-х недель до 6-и месяцев). Этот период получил названия «окна», когда анализы на антитела еще отрицательные, но вирусы интенсивно размножаются, а сам больной становится опасным в плане заражения контактных лиц. Выявить инфицированного можно через более короткий (1 — 2 недели) период после заражения, для чего применяется полимеразная цепная реакция (ПЦР). Однако из-за дороговизны данный вид исследования для скрининга не используется.
Иммуноферментный анализ при диагностике ВИЧ
У 90 — 95% инфицированных лиц антитела в сыворотке крови появляются через 3-и месяца после заражения, У небольшой части больных (5 — 9 %) антитела появляются в период от 3 до 9 месяцев и у 0,5 — 1% — в более поздние сроки. В терминальной стадии СПИДа количество антител снижается значительно, а в некоторых случая исчезают вовсе.
С 1985 года данная методика используется на территории РФ с целью массовых исследований. Он прост в исполнении, показывает довольно точные результаты, является дешевым по сравнению с другими методиками. В связи с возможностью получения ложноположительных результатов все положительные результаты исследуются дважды, после чего сыворотка крови больного исследуется подтверждающим тестом — иммунного блота. При этом используется тот же образец крови. При наличии 2-х положительных результатов с применением ИФА и иммуноблота в одной пробе ставиться диагноз ВИЧ-инфекции.
В РФ используются обычно ИФА 4-го поколения. Исследование проводится с целью получения суммарного спектра антител против белков (антигенов) ВИЧ — р24 и gр160.
Тест видит как антитела, которые вырабатываются организмом больного, так и антигены (белки вируса) р24. «Период окна» для тестов 4-го поколения более короткий. Уже через месяц можно получать достоверные результаты. Однако более надежными, как считают специалисты здравоохранения РФ, являются сроки 6, 8 или 12 недель.
Рис. 8. На фото иммуноферментные анализаторы.
Рис. 9. На фото иммуноферментный автоматический анализатор.
Для первичного обследования групп лиц с целью выявления ВИЧ-инфекции применяется только методика ИФА.
Метод иммуноблотинга
Метод иммуноблотинга является более точным, чем ИФА, по мнению большинства специалистов — эталонным. С его помощью в сыворотке крови обнаруживают антитела к белкам ВИЧ. Методика применяется с целью подтверждения результатов, полученных при проведении ИФА. Обладает высокой специфичностью. Ложноположительные результаты встречаются редко. Достоверность полученных результатов достигает 99%. Иммуноблотинг является дорогостоящей методикой и требует высокой специализации специалиста, проводящего исследование. Возможно получение сомнительных результатов.
Метод основан на разделении антигенов (белков) ВИЧ с применением электрофореза по молекулярной массе. Первыми при инфицировании выявляются антитела против капсидных белков «Gag» (р24 и р17) и прекурсор р55. Вслед за ними появляются антитела против суперкапсидных белков «Env » (гликопротеидов gр 160, gр120, gр41 и белков р88) и неструктурных белков «Pol» (р31, р51 и р66). В ряде случаев могут определяться антитела против генов «vpu », «vpr », «vif », «tat », «nef », «rev », «tat ».
Сыворотка крови больных ВИЧ-1 и ВИЧ-2 содержит антитела ко всем белкам вирусов, но для подтверждения диагноза определяются у ВИЧ-1 только антитела к белкам р24, gр41, gр120 и gр160, у ВИЧ-2 — антитела к белкам gр105, gр140 и gр36.
При наличии 2-х положительных результатов с применением ИФА и иммуноблота в одной пробе ставиться диагноз ВИЧ-инфекции.
Рис. 10. Аппарат для проведения исследования методом иммуноблота.
Рис. 11. Диагноз ВИЧ-инфекции ставиться при наличии 2-х положительных результатов с применением ИФА и иммуноблота в одной пробе.
Тест-системы для подсчета СД4-лимфоцитов
Одним из иммунологических тестов, применяемых при ВИЧ-инфекции, является методика подсчета СD4 и СД8-лимфоцитов в крови.
СD4-лимфоциты (Т-хелперы) поражаются вирусами иммунодефицита. Постепенное истощение их популяции приводит к снижению иммунитета и организм больного перестает противостоять инфекции. Подсчет CD4-лимфоцитов осуществляется методом проточной цитометрии с помощью автоматических анализаторов или вручную при оптической или флюоресцентной микроскопии. По количеству СD4-лимфоцитов определяется время начала специфического лечения (антиретровирусной терапии) и профилактики оппортунистических инфекций, оценивается эффективность лечения.
- При количестве CD4-лимфоцитов в сыворотке крови от 500 и ниже в 1 мл говорит о развитии иммунодефицита.
- При снижении количества CD4-лимфоцитов до 200 в 1 мл (норма от 600 до 1900 клеток в 1 мл) развивается синдром приобретенного иммунодефицита — СПИД.
- При снижении уровня CD4-лимфоцитов до 50 и ниже в 1 мкл СПИД переходит в терминальную стадию.
Удельный вес CD4-лимфоцитов среди всех лимфоцитов в норме составляет около 40%. Снижение показателя до 20% говорит о развитии СПИДа.
CD 8-лимфоциты (Т-киллеры, на англ. killer - убийца) уничтожают вирусы ВИЧ путем цитолиза. Их пролиферация (увеличение количества) зависит от активности Т-хелперов. При ВИЧ-инфекции количество CD4 и CD8-лимфоцитов уменьшается, но более всего падает уровень CD4-лимфоцитов. Соотношение CD4/ CD8 в норме составляет 1,5 — 2,5. При снижении количества CD4- лимфоцитов отмечается снижение индекса.
Его величина менее 1 говорит о развившемся иммунодефиците, при показателе соотношения 0,6 — 0,8 развивается СПИД.
При получении положительных результатов тестирования человек должен стать на учет в государственное учреждение Центр профилактики и борьбы со СПИД, где будет установлен мониторинг за его состоянием и назначено адекватное специфическое лечение.
Рис. 12. На фото проточные автоматические анализаторы с помощью которых осуществляется подсчет CD4-лимфоцитов в крови исследуемого.
Тест на ВИЧ с применением ПЦР
Все большее распространение в последние годы получает молекулярно-генетический метод диагностики ВИЧ-инфекции — полимеразная цепная реакция (ПЦР). С ее помощью определяется генетический материал возбудителя — РНК уже через 1 — 2 недели после предполагаемого заражения, а высокая чувствительность теста позволяет выявлять РНК вирусов даже если их в исследуемом материале находятся единицы. Данная методика является дорогостоящей и поэтому в настоящее время для скрининга не используется. К тому же значимой проблемой исследования является возможность получения ложноположительных результатов.
Суть методики ПЦР при ВИЧ
Суть данной методики заключается в получении множества копий РНК вируса (нуклеиновой кислоты), в последующем выявляемых как по характерному строению, так и с помощью меченых ферментов или изотопов.
Возможности ПЦР при ВИЧ-инфекции
С помощью ПЦР можно разрешить сомнительные результаты, полученные при применении методики иммуноблотинга, диагностировать ВИЧ-инфекцию на ранних стадиях (уже через 1 — 2 недели после предполагаемого заражения), контролировать эффективность проводимой антиретровирусной терапии, определять стадию заболевания.
Рис. 13. На фото слева нормальный Т-лимфоцит, справа — Т-лимфоцит, инфицируемый ВИЧ. Видны множественные пузыри, между которыми появились новообразованные вирусы (мелкие округлой формы образования). С помощью ПЦР ВИЧ-инфицированность выявляется уже через 1 — 2 недели после предполагаемого заражения.
Преимущества методики ПЦР при ВИЧ
- С помощью ПЦР возможно выявить сам вирус и его количество.
- Возможность использования у детей младше полутора лет.
- Проводить оценку эффективности лечения.
- Определить тяжесть и прогноз заболевания.
Недостатки методики ПЦР при ВИЧ
- Большая стоимость исследования.
- Наличие специализированных лабораторий.
- Длительность получения результатов (до 4-х недель).
Кому проводится ПЦР
- Получение результата на 7 — 10 день лицам в случае предполагаемого инфицирования, когда желателен результат, полученный в короткие сроки.
- Для определения срока начала и оценки эффективности проводимого лечения.
- ПЦР проводится инфицированным беременным за 4 недели до родов с целью решения вопроса о применения кесарево сечения.
- Новорожденным от инфицированных матерей. Дважды полученный положительный результат свидетельствует о заражении ребенка.
В обычных условиях для скрининга и диагностики ВИЧ-инфекции ПЦР не используется
РНК ПЦР и ДНК ПЦР. В чем разница
- РНК ПЦР доказывает факт наличия вируса иммунодефицита в крови и объем выявленной РНК. Данное исследование применяется у диагностированных лиц с целью оценки эффективности проводимой терапии.
- С помощью ДНК ПЦР определяется наличие вируса в мононуклеарных клетках у детей, когда антитела к вирусу иммунодефицита человека у матери мешает использовать методику ИФА.
Вирусная нагрузка определяется путем подсчета количества РНК-копий в 1 мл плазмы крови, что позволяет определить стадию заболевания, провести анализ проводимого специфического лечения, определить тяжесть и прогноз заболевания. Чем выше вирусная нагрузка, тем меньше в плазме крови регистрируется CD4-лимфоцитов.
Интерпретация результатов:
- РНК либо не выявлена, либо число копий РНК менее 20 в 1 мл. плазмы.
- РНК выявлена на пределе чувствительности — менее 20 копий/мл.
- РНК от 20 до 10 6 копий в 1 мл плазмы крови говорит о достоверности результата.
- РНК-копий более 10 6 мл — верхний предел линейного диапазона.
Увеличение вирусной нагрузки у больного с ВИЧ-инфекцией в три и более раза является клинически значимым результатом.
Контроль над вирусной нагрузкой проводится каждые 3 месяца у больных, лечение которым еще не проводится. В случае начала проведения антиретровирусной терапии контроль осуществляется через 2 — 8 недель.
Рис. 14. ПЦР в последние годы пользуется все большей популярностью.
Рис. 15. Амплификаторы для проведения ПЦР.
Тест на ВИЧ необходимо проводить на ранних сроках инфицирования и периодически при заболевании, что обеспечит своевременное назначение антиретровирусной терапии предупреждение и развития грозных инфекционных и онкологических процессов.
Культивирование вируса
Обнаружить вирусы, его РНК, ДНК, антигены и антитела можно не только в сыворотке крови, но и сперме, слюне, содержимом влагалища и др. Культивируют ВИЧ в культуре клеток лимфоцитов. Методика является высокочувствительной и специфичной (до 100%), однако дороговизна исследования не позволяет его использовать в повседневной лабораторной работе.
Общий анализ крови на ВИЧ
В результате поражения вирусами иммунодефицита человека кроветворных органов отмечается угнетение кроветворения, что проявляется снижением числа лимфоцитов (лимфопения), нейтрофилов (нейтропения), тромбоцитов (тромбопения) и анемия. К тому же на разрушение клеточных популяций оказывают влияние аутоиммунные процессы, развивающиеся у ВИЧ-инфицированных больных. В сыворотке крови больных доминирут иммуноглобулины IgG.
Рис. 16. Забор крови из вены и пальца для анализов.
Сегодня сдать анализ на ВИЧ можно любому человеку анонимно и бесплатно за считанные минуты, а современное оборудование и обученный персонал позволяют получить максимально точные результаты.